par Chob » 29 Mar 2013, 14:53
Salut !
Les pics correspondent aux couleurs des fluorochromes couplés aux ddNTP.
Tu as 4 ddNTP différentes, chacun couplés à un fluorochrome de couleur différentes, donc tu as 4 couleurs : C: bleu / G: noir etc.
Et vu que les ddNTP stoppent la synthèse du brin complémentaire et qu'on fait ++ de cycles, tu vas finir par obtenir toutes les tailles de brins et tous ces brins vont se terminer justement par un ddNTP.
Du coup en séparant tous les brins obtenus par ordre de taille, tu vas lire la couleur des fluorochromes dans cet ordre et par association couleur-ddNTP, tu vas avoir le séquençage de la région.
Quand tu fais ton séquençage finalement tu séquences les 2 allèles du gène concerné en même temps.
Sauf que parfois, les 2 allèles d'un même gène sont différents : l'un des deux peut être muté.
Ici c'est le cas : les 2 pics superposés indiquent enfait que l'individu est hétérozygote:
- le pic bleu indique qu'en cette position sur un deux 2 allèles tu as un G (dans ce cas là, c'est le brin complémentaire qui est séquencer, donc il faut que tu prennes le complémentaire de chaque base pour obtenir le séquençage brin "matrice" : le pic bleu indique que tu as un C sur le brin complémentaire, donc un G sur le brin "matrice")
- le pic noir indique qu'en cette position sur un des deux allèles tu as un C (pic noir = G sauf que c'est le séquençage du complémentaire -> C sur le brin "matrice")
Tutrice Bio Mol' & UE 11 2012 - 2013
Ronéoiste UE11 2012 - 2013
