Fluorescence induite

[I.Z.I]

Oyé Oyé !

Je pense qu'il y a une erreur sur cette partie du cours, dans la fiche de la tut' rentrée (après mon raisonnement est peut être erroné).

Je me demande comment est il possible de visualiser de l'ARN avec de l'Hoesht et Dapi sachant que celui ci reconnaît les bases A et T et que l'ARN ne possède pas de base T il me semble?

Et aussi, comment visualiser l'ARN via un intercalant sachant que celui ci ne possède qu'un seul brin ?

Voilà, merci d'avance ! Besoooooos

[Fat'Matt]

Salut à toi

1) Je pense que tu n'as pas faux dans ton résonnement, pour moi Hoescht et DAPI se fixent aux bases A et T de l'ADN uniquement. Sans besoin qu'on traite les chromosomes. (D'ailleurs cette coloration marque plus puissamment l'hétérochromatine simplement parce qu'elle est plus condensée donc a plus de bases AT par mm2 )

--> Donc pour moi ils n'interviennent pas sur l'ARN !

2) Je t'avoue que j'en ai aucune idée du coup, et que c'est une bonne question, donc attendons la réponse d'un tut' ! D'ailleurs, du coup, si ni les intercalants, ni Hoescht et DAPI ne s'appliquent à l'ARN, comment se fait le phénomène de fluorescence induite pour l'ARN ?

[I.Z.I]

Oui, en fait c'est justement ça que je me demande

je pense justement qu'il ne se fait pas du tout et que c'est erreur ...

On tombe tous les deux d'accord dans nos raisonnement en tout cas !

Bonne journée à toi

[Fat'Matt]

Hum, non une chose est sur c'est que le prof' considère qu'il se fait, il l'a dit plusieurs fois ! Maintenant je pense pas que nos résonnements soient faux, donc il doit y avoir un autre moyen

Bonne journée à toi aussi

[Audre_yy]

Salutations à vous !!!

Après moulte débats et recherches ... voici une explication !!!

Alors en effet le hoesch et le DAPI ne se fixent pas à l'ARN puisque, comme vous l'avez dit, ils vont se fixer aux bases A et T avant de devenir fluo et l'ARN n'a pas de T
En revanche le bromure dethidium lui est bien capable de fixer l'ARN !! Et la la grande question c'est COMMENT ??

En fait il va se fixer en tant qu'intercalant sur les petites et rares portions de l'ARN qui sont complémentaires ( donc double brin ). ( Ouais moi aussi je viens de découvrir grâce a vous que certaines pitites portions de l'ARN sont double brin ^^ )

Voili Voilou !! Après l'année dernière le prof n'en parlait absolument pas dans son cours, il dit juste que c'est possible donc ne vous prenez pas trop la tête la dessus

Poutou Poutou

[I.Z.I]

Ah d'accord merci beaucoup !

Non je me prend pas la tête dessus je trouvais juste ça étrange mais s'il y a des portion d'Arn double brin tout prend son sens haha ! Sacré bromure d'ethidium...

Peace!

[Fat'Matt]

Ahah parfait ! Tout s'explique !

Merci pour ta réponse, bonne journée !