FISH (ronéo 3 p 9)

[Hélèn83]

Bonjour!

Je ne comprend pas bien la technique FISH !!
en fait j'ai compris qu'elle sert à révéler un acide nucléique en particulier grâce à une sonde, mais je ne comprend pas bien quelle est cette "sonde" !!!!

je ne comprend pas non plus, par exemple, le digogénine (p9 ronéo3) peut "interagir avec des molécules fluorescentes" et en quoi cela à un rapport avec la sonde ?!

ou bien cette phrase (p9) : "on peut faire le choix de la molécule qui va directement ou indirectement rendre fluorescent la sonde nucléique et visualiser plusieurs gènes simultanément."

enfin bref je crois qu je me suis un peu embrouiller avec cette technique et je ne comprend pas trop cette histoire de "sonde" complémentaire à l'ADN .. GROSSE CATAAAA, misère!!!!

Si quelqu'un peu démêler tout ça ce serait vraiment cool !!!!!

[Kick-Ass]

Hi !

En fait tu as vu qu'avec la fluorescence induite tu pouvais repèrer l'ADN . Mais c'est très peu spécifique. FISH te permet de mettre en évidence des gènes en particulier. En gros tu va rechercher un gène qui t'interesse, et tu voudrais savoir chez un patient si par exemple celui-ci est présent, mais juste ce gène.

Tu crée une séquence complémentaire de ton gène suffisament longue qu'on appelle une sonde, qui va etre capable de s'hybrider avec ce gène mais juste lui. Il faut encore que tu rende cette sonde fluorecence. Soit tu couple les acides nucléiques de ta sonde avec une molécule directement fluorescente, soit dans le cas de la digoxigénine(pas directement fluorescente) tu la couple avec les AN de ta sonde, et ensuite par interaction avec des anticorps qui eux sont fluorescents et donc qui reconnaitront la DIG tu permettra de mettre ton gène en évidence si ta sonde s'est hybridée avec lui (donc si ton gène est présent).

De ce fait si tu as un retour de fluorescence ton gène d'intéret est présent dans ton étude, si aucune fluorescence la sonde ne s'est hybridée avec rien donc pas de fluorescence.

C'est une technique très utilisée dans le diagnostic de pathologies génétiques

[Hélèn83]

Merci beaucoup !!!!!

[Audre_yy]

Saluuuut !!

Et merci kick Ass !

Poutoux hybrides