Étude sur cellule morte

[mariieyep]

Salut, est ce quelqu un pourrait me mettre au clair quand la cellule est morte selon les différentes méthode d étude, je sais que la coloration tue les cellules et qu appelée ment la permeabilisation aussi mais toute les méthodes chimiques trou la membrane et ça ça tue aussi ? Car sinon je ne vois pas où les cellules restent vivantes appart dans la fluorescence induite ! merci

[Audre_yy]

Coucou !!

Alors en résumé pour les différentes techniques :
Contraste de phase = vivante
Fluorescence : FRET, FRAP, FLIP = vivante
Immunofluorescence = vivante (sauf si on veut que nos anticorps se fixent a une protéine intra cellulaire, dans ce cas la pour les faire rentrer on est obligé de tuer la cellule )

Fluorescence induite = vivante
FISH = dénaturation donc morte
Microscopie confocale = possible sur cellules fixées et donc mortes (le plus souvent) et sur cellules et tissus vivants
Microscopie à super résolution = vivante (on utilise en fait des fluorochromes)

Microscopie électronique à balayage = morte en général mais on peut parfois observer la cellule '' en train de mourir ''
Microscopie électronique en transmission (marquage à l'or, coloration par ombrage, cryomicroscopie) = morte
Car dans les deux cas elle doit être fixée !

Microscopie à force atomique = vivante !!


Voilou !! j'espère que ça t'aide (possible que j'en ai oublié ... Dis le moi )

[ExAO]

Bien le bonjour,

En microscopie confocale, les cellules sont vivantes ? Je pensais qu'elles étaient morte car il est préférable de les fixer... Non ?


Bonne journée

[Audre_yy]

Alors d'après ce que j'ai ou trouver comme infos c'est réalisables sur tissus et cellules vivantes ou fixés
Même si c'est vrai que c'est souvent utilise sur des cellules fixées.

Du coup j'edite quand même pour plus de précision ^^

Poutoux a toi

[ExAO]

Je te remercie pour ces informations complémentaires qui vont me permettre de continuer à étudier cette matière qu'est la biologie cellulaire enseignée par le professeur Gilson dans le cadre de l'unité d'enseignement 2 de la Première Année Commune des Études de Santé.


La bise à Tata Monique et encore merci pour ces informations à la limite de la perfection

[mariieyep]

Oui merci beaucoup ^^ mais l immunofluorescence a chaque fois on chercher en général des protéine intra membranaire ? Et puis à chaque fois que l on hybridé un gène on est obliger d introduire le gène par méthode chimique et donc de tuer la cellule non ?

[Audre_yy]

Alors globalement dans l'immuno fluorescence on va plutôt étudier des protéines d'expression membranaire donc pas besoin de tuer la cellule !!

Après pour rendre fluorescente une molécule on n'a pas forcément besoin de tuer notre petite cellule
On peut utiliser électroporation qi est assez invasive mais ne tue pas (les trous sont temporaires )
Y'a aussi la vectorisaiton qui est tout a fait naturelle, la micro injection ...

Et quand on veut créer un hybride on peut tout a fait l'injecter sans avoir besoin de tuer notre cellule non plus ( on peut utiliser des vecteurs qui vont en fait s'intégrer a la cellule sans lui faire de mal ^^ )

Mieux ??

[mariieyep]

Et juste pour la fluorescence induite les cellule sont mortes non ?? Enfin pour les intercalents ? Pour hoescht et dapi je crois que c est vivant ?

[chloe]

Pour les intercalants la cellule meurt et hoescht , elle reste en vie

[mariieyep]

Un grand merci je vais enfin éditer ce message =P