Cryomicroscopie

[Presci]

Bonjour !

Est ce que la cryomicroscopie permet d'éviter la déshydration ET la fixation ?
Ce que je comprends pas c'est que quand on congèle notre échantillon à l'azote on va le fixer non ?

Est ce que dans la ronéo 4 page 7 " cette technique permet d'éviter la dénaturation" on sous entends que l'on n'utilise pas d'agents de fixations mais que l'échantillon est fixé quand même ? Ou alors il n'est vraiment pas fixé



Merci d'avance bonne journée

[May']

salut, désolée je ne t'apporte pas de réponse, mais ton raisonnement m'intéresse

[Presci]

Je fais remonter le sujet sur la première page

[Quiche]

Bonjour !

Est ce que la cryomicroscopie permet d'éviter la déshydration ET la fixation ?
Ce que je comprends pas c'est que quand on congèle notre échantillon à l'azote on va le fixer non ?

Est ce que dans la ronéo 4 page 7 " cette technique permet d'éviter la dénaturation" on sous entends que l'on n'utilise pas d'agents de fixations mais que l'échantillon est fixé quand même ? Ou alors il n'est vraiment pas fixé



Merci d'avance bonne journée

Salut

D'après ce que j'ai compris, la cyomicroscopie permet effectivement de ne pas fixer et déshydrater l'échantillon
On a pas besoin de fixer la cellule car la fixation permet à la cellule de ne pas être détruite quand on envoie les électrons, ici, la fixation est donc inutile car on n'envoie pas les électrons directement sur l'échantillon .
Pas besoin de déshydrater la cellule ! C'est effectivement le but de la cryomicroscopie : éviter la déshydratation. À partir du moment où on enlève l'eau, on enlève un constituant essentiel de la cellule et donc on ne respecte plus l'intégrité de l'échantillon.
Pourquoi sommes-nous obligé d'enlever l'eau ? Parce que l'eau serait immédiatement sublimée (liquide -> gazeux) sous vide et donc c'est problématique. En cryomicroscopie, on va geler l'échantillon ce qui va permettre de conserver l'eau tout en étudiant l'échantillon sous vide.


Quand on parle de l'azote, ce n'est pas un agent de fixation mais c'est un milieu glacial L'azote liquide peut effectivement atteindre jusqu'à -150° donc c'est un bon moyen pour congeler rapidement la cellule. On fait ça vite pour limiter les dégâts

[Presci]

Merci beaucoup pour ta réponse Quiche!

Je passe en résolu, bonne soirée !

[♦MC♦]

Yo, je suis d'accord avec Quiche, c'est juste que j'ai une p'tite interrogation, on a bien fixation pour la MET à coloration par ombrage alors que les e- sont balancés sur la réplique, non ?

[Azula]

Salut

Moi ceux que j'ai compris c'est que dans la cryomicroscopie, on ne fixe pas la cellule à proprement parler.
La fixation permet de fixer les interactions moléculaires grâce à des agents bivalents.
Dans la cryomicroscopie on gèle les structures moléculaires (elles sont fixées par le froid), sans l'étape de fixation glutaraldéhyde ...

PAS DE FIXATION CHIMIQUE + PAS DE DESHYDRATATION = PAS DE DENATURATION