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Ronéos 2 et 3


Ronéos 2 et 3

Messagepar Aucune idée » 09 Déc 2013, 17:28

Salut
Je n'arrive pas à comprendre pourquoi dans le cas de la fluorescence induite (Hoescht intercalants...) on puisse aussi parler d'immunofluorescence puisque l'on n'utilise pas d'anticorps..
C'est marqué Ronéo 2 page 16

Une question très bête mais on ne peut pas utiliser les intercalants avec l'ARN?

Lorsque l'on utilise la technique du FISH pourquoi si le gène n'est pas présent et donc que la sonde ne s'est pas appareillé pourquoi on n'aura pas de fluorescence, puisque notre fluorochrome marcherait quand même pourtant, non ?

Merci :)
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar chloe » 09 Déc 2013, 18:57

C'est une erreur je vais le mettre en errata et pour ta deuxième question s'il n'y a pas de gène, il n'y a pas d'appariement de ta sonde donc pas de fluorescence. je vois pas comment on pourrait l'expliquer autrement :)
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar Aucune idée » 09 Déc 2013, 19:31

Super merci :)

Ben pour le truc de la sonde, le fait qu'elle s’apparille va "activer" notre fluorochrome qui va pouvoir devenir fluorescent c'est ça?
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar chloe » 09 Déc 2013, 19:35

Ça c'est pour le hoescht et tout ! :)
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar Aucune idée » 09 Déc 2013, 19:45

Donc je suis désolé d'insister dessus mais je comprends pas...

On met notre sonde d'ADN avec on va dire un nucléotide couplé à un fluorochrome.
Ensuite 2 possibilités :
Soit il se fixe à son ADN complémentaire simple brin -> Fluorescence
Soit il se fixe pas -> Pas de fluorescence
Jusque la c'est bon ? :)

Ce que je ne comprends pas c'est lorsqu'il ne se fixe pas, pourquoi le fluorochrome ne marche plus? C'est a dire pourquoi il n'y a pas de fluorescence? Certes notre sonde n'est pas en contact avec notre gène mais notre fluorochrome à condition d'avoir sa lumière d’excitation devrait quand même émettre une couleur non ?

Je ne sais pas trop si tu m'as suivi mais voila :)
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar chloe » 09 Déc 2013, 19:51

Oui je comprends ton problème mais mes compétences s'arretent là ^^ je peux pas t'en dire plus :)
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar Aucune idée » 09 Déc 2013, 19:53

Bah c'est pas grave
Je retiens juste que si la sonde est en contact avec notre gène j'aurai de la fluorescence, ça suffit? :p
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Re: Ronéos 2 et 3

Messagepar chloe » 09 Déc 2013, 21:56

oui , mais de toute façon il ne vous posera pas de questions sur ce qu'il n'a pas dit :)
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