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Méthode de Sanger :)

Sujet verrouillé

Méthode de Sanger :)

Messagepar ♦MC♦ » 26 Mar 2014, 16:40

Salut ! :soldier:

Quelqu'un a-t-il décelé dans le cours une explication sur le :

"Pourquoi on peut utiliser 1 seul tube dans la méthode récente associée au ddNTP-fluorochromes, alors qu'on est obligé d'en utiliser 4 pour la méthode ddNTP-radiomarqués ?"

Je pense que le/la prof ne l'a pas dit non ?


:angel: :cowboy: :alien: :) :D :P :jump: :party:

(Merci d'avance :) )
Dernière édition par ♦MC♦ le 26 Mar 2014, 21:43, édité 1 fois.
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Re: Méthode de Sanger :)

Messagepar Azula » 26 Mar 2014, 21:05

Salut MC :)

Alors d'après ce que j'ai compris c'est parce que dans l'ancienne méthode on n'utilisait pas les fluorochromes spécifiques à un ddNTP, comme dans la méthode Sanger.

Donc pour différencier les différents ddNTP incorporés on était obligé d'utiliser 4 tubes différents dans lequel tu auras plein de dNTP différents (ATGC), mais qu'un seul type de ddNTP marqué.
Pourquoi ?
Car ensuite pour déterminer le séquençage, on fait une migration électrophorétique et si y avait qu'un puit, la radiographie de la plaque ne discriminerait pas les différents ddNTP. En effet ils sont tous marqués de la même manière ( radio en noir et blanc ) :arrow: séquençage impossible. Donc on utilise 4 puits chacun spécifique d'un tube. :glasses-nerdy:

Comment on fait pour lire l'électrophorèse ? :smileyFred&Jamy: :lol:

:arrow: pour déterminer la position relative de chaque nucléotide, on observe la migration :
plus le brin "élongué" a migré loin plus il est petit, donc plus le ddNTP qu'il a intégré est tôt dans la séquence ce qui a bloqué l'élongation...

:arrow: pour déterminer la nature du ddNTP on regarde le puit correspondant
( 4 puits pour 4 ddNTP différents )

Voilà mais heureusement cette méthode fastidieuse de lecture en "zigzag" est révolue, grâce au fluorochrome.
:arrow: un puit suffit ( un capillaire dans les séquenceurs capillaires )
:arrow: on a une succession de brin néoformé en fonction de leur taille OK
:arrow: on discrimine les ddNTP qui ont bloqué l'élongation par la couleur spécifique de leur fluorochrome(rouge/noir/bleue/ou vert) et non plus en fonction du puit dans lequel ils se trouvent.



Alléluia mes frères

J'espère que ça t'aide ;) :angel: :alien: :handshake: :party:
Dernière édition par Azula le 26 Mar 2014, 21:44, édité 1 fois.
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Re: Méthode de Sanger :)

Messagepar ♦MC♦ » 26 Mar 2014, 21:43

:) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 <3 <3 <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: <3 :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: <3 :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :) :D ;) :P :lool: 0_o :neutre: :doctor: : :D : : :) : :o 8) :lol: : :P : :cry: :wink: :!: :idea: :mrgreen: :act-up: <3 :alien: :angel: :bashful: :beauty: :blowkiss: :clap: :clown: :cowboy: :curl-lip: :cute: :cyclops: :dance: :desire: :devil: :disdain: :drool: :embarrassed: :giggle: :glasses-cool: :glasses-nerdy: :handshake: :in-love: :jump: :kissed: :music: :party: :pray: :rotfl: :smirk: :snicker: :snowman: :soldier: :victory: :dance: :dance: :dance: :dance:


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Re: Méthode de Sanger :)

Messagepar Lady Vic » 26 Mar 2014, 21:45

Et beh !!! Je crois que MC SCHURROS est content :party:
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Re: Méthode de Sanger :)

Messagepar Azula » 26 Mar 2014, 21:48

Il est fou :lol:
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