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par **Avendil** » 28 Mar 2014, 14:41

Salut !

Alors je ne saisi pas trop le principe de l'activité exonucléase de la taq polymérase : son but est, à partir d'un brin d'ADN, d'en synthétiser un autre si j'ai bien compris ?
Donc comment peut-elle aussi dégrader les ADN simple brin qu'elle rencontre, ne dégraderait-elle pas ce qu'elle produit :question:

Merci d'avance !

par **Gloria** » 28 Mar 2014, 15:45

Coucou en fait pour moi il doit y avoir une petite erreur à cet endroit de la ronéo et (pourvoi toujours) il devrait y voir marqué : la Taq polymérase a une activité exonucléasique sur l'ADN DOUBLE brin (et non pas simple!! )

En fait tu dénature ton ADN donc de 2 brins tu passes à un seul et tu as ta sonde Taq Man qui va aller s'hybrider avec une région de ton ADN qui est devenu simple brin !
quand la Taq Polymérase va passer , elle va d'abord enlever la sonde (donc séparer le quencher du fluorochrome d'où la fluorescence ) et ensuite elle va reprendre son activité d'élongation !

J'espère que c'est plus clair si un tut pouvait passer par içi pour confirmer ou infirmer svp

par **Lady Vic** » 30 Mar 2014, 08:54

Coucou

Gloria a écrit:quand la Taq Polymérase va passer , elle va d'abord enlever la sonde (donc séparer le quencher du fluorochrome d'où la fluorescence ) et ensuite elle va reprendre son activité d'élongation !

-> La sonde Taqman s'hybride au brin parent et non au brin complémentaire ! Du coup quand la Taq polymérase va vouloir allonger le brin complémentaire, elle va être bloquée par le sonde, et c'est pour ça que la polymérase va devoir "casser" la sonde pour passer, pour continuer l'élongation du brin complémentaire.

Voili, voilou

J'espère que c'est + clair

Bon dimanche et bon courage :embarrassed: