Immunofluorescence

[Sherlock]

Bonjour
J'ai un peu du mal à savoir quand une cellule est vivante ou morte avec l'immunofluoresçence. Si l'AC est à l'intérieur de la cellule, est-ce qu'elle peut être vivante?

Merci d'avance

[levure]

Salut!

L’immunofluorescence utilise des anticorps fluorescents qui sont des grosses molécules. Vu leur taille, on ne pourra pas les faire rentrer dans les cellules avec les techniques de sonication, d'électroporation etc.

Tu vas avoir 2 grands cas en immunofluorescence:

1) On veut étudier une protéine qui émerge à la surface de la cellule protéine membranaire

Il n'y a pas de problème, on met juste nos cellules en présence des anticorps, ils vont reconnaître la strucure protéique et on pourra localiser ces protéines grâce à la fluorescence. On peut travailler sur des cellules vivantes ou mortes

2) On veut étudier une protéine située à l'intérieur de la cellule protéine cytoplasmique, nucléaire...

Pour faire rentrer les anticorps, on va être obligé d'utiliser un traitement chimique qui va perméabiliser la membrane plasmique et va induire la mort des cellules (il faut vraiment faire des gros trous pour faire rentrer les anticorps). On travaille donc sur des cellules mortes.

[Sherlock]

Ok merci (d'avoir repondu si vite )