ChIP Enrichissement

[Sow~]

Hellooooo!

Alors, y a un truc que j'arrive pas à comprendre dans l'immunoprécipitation...

Dans la Ronéo 10 page 8, nous nous dit :

On fait une immunoprécipitation : on purifie uniquement les fragments de chromatine associés à l'anticorps = les complexes immuns.
On va enrichir notre mélange avec les fragments de chromatine associés à la modification "vert".
On réverse le pontage et on purifie l'ADN.

Donc c'est la phrase en gras et soulignée que je comprends pas...
À quoi ça correspond l'enrichissement??? Quand on dit "on va enrichir notre mélange", ça veut dire quoi? Est ce qu'on rajoute quelque chose à notre mélange? Bref, j'arrive pas du tout à visualiser cette étape du ChIP et à comprendre cette notion...

J'avais déjà lu les explications des autres posts à propos du ChIP, et aussi la fiche de l'année dernière, mais je finis toujours par bloquer sur cette notion d'enrichissement...

Voilà! I really need your help...!! Ahah
MERCIIII!

[Parendar]

Salut,+1J'ai pas compris ce passage et cette partie du cours

[Polo]

+1

[Claraleuse]

Salut

j'ai trouvé ça :
viewtopic.php?f=226&t=17562
ça peut peut-être aider un peu !!!

[Parendar]

Merci,tu gère(l'ex tutrice aussi^^),un dernier point:dans quel cas, au niveau des modifications d'histone on a Rc=Rip,donc pas d'enrichissement?

[Sow~]

Heeey!

Merci beaucoup Claraleuse pour le lien!!!! Ca m'a bien aidée!!

Sinon, Parendar, je suis tombée sur ce post : viewtopic.php?f=335&t=28186
Peut-être que ça répond à ta question! Dans la réponse de Fat'Matt, il y a des exemples avec les différents cas, notamment quand Rip = Rc!

Voilà! Bonne journée!!

[levure]

Salut!

J'espère que vous avez trouvé votre bonheur dans ces posts, sinon dites moi ce qui vous pose encore problème je vous expliquerai au mieux.
Dans tous les cas sachez que chaque année ça pose des problèmes à tout le monde tout simplement parce que le prof ne nous donne pas toutes les étapes, je pense qu'il nous manque trop d'éléments pour vraiment comprendre très précisément comment ça marche.
Sachez aussi qu'après avoir fait les annales de Gilson, j'ai jamais vu la moindre question ayant un rapport de près ou de loin avec l'immunoprécipitation de chromatine

[Sow~]

Coucou!

Merci à toi levure pour ces précisions!!
C'est tout bon pour moi en tout cas, donc j'attends de voir pour Parendar et polo88!

Merci à toi d'être passé, et courage pour ce WE! Tu seras le seul représentant de la Biocell

[Emilie2]

L'année dernière, les tut avaient fait une fiche sur l'immunoprécipitation
viewtopic.php?f=484&t=37230

[Parendar]

Salut,merci pour les liens et le reste ça aide bien ^^. Par rapport à la fiche et aux autres posts j'ai remarqué ça quelque fois:"L'ADN obtenu(après immuno précipitation donc) est différent de l'ADN de contrôle avant l'immuno précipitation"je ne comprends pas très bien comment il pourrait être différents en n'ayant pas modifier la structure.
Voila,voila

[levure]

Il est différent tout simplement parce qu'on a sélectionné uniquement certains fragments de chromatine qui nous intéressaient.
Dans l'immunoprécipitat, on aura uniquement des fragments d'ADN avec la modification post traductionnelle recherchée
Dans l'ADN de contrôle, on a la totalité de l'ADN

Ces ADN ne sont pas identiques

[Parendar]

Réponse express ,pour moi c'est bon.
Merci et bonne soirée