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Visualiser 2 proteine distincte


Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar Mendel » 16 Déc 2014, 17:23

Bonjour , alors voila j'aimerais bien une confirmation , si dans le sujet on nous dit qu'il faut du lapin et de la souris pas exemple !
Pour visualiser les 2 proteine distincte :

1) souris antiimmûoglobîe de cheval et lapin antimûnoglobuline de chevre : on le compte faux non?


2) souris antiimmûoglobîe de cheval et chevre antimûnoglobuline de lapin :on le compte faux aussi non?

Voila voila , merci

Le seul qui serait juste c'est :

X antiimûoglobulîne de lapin et Z antiimûogobline de souris ?
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Re: Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar levure » 16 Déc 2014, 23:05

Salut :gigi:

Désolé j'ai vraiment pas compris ta question, tu pourrais me reformuler stp? :?
Sinon j'te fais un ptit récap en attendant :gigi:
Pour visualiser 2 protéines différentes dans la même cellule et pour pouvoir les distinguer l'une de l'autre en immunofluorescence indirecte:
Il faut :
- que les 2 anticorps primaires viennent d'espèce différentes l'un de l'autre
- que chaque anticorps primaire provienne d'une espèce différente de celle de l'antigène pour lequel ils sont spécifiques
- que chaque anticorps secondaire appartienne à une espèce différente de celle de l'anticorps primaire contre lequel il est dirigé
- que les 2 anticorps secondaires soient couplés à des fluorochromes différents
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Re: Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar Mendel » 16 Déc 2014, 23:17

Oui oui je suis bien d'accord sur sa mais enfete ma question c'est les animeaux qui sont indiquer dans le sujet doigent etre les anticorps primaire ou bien les secondaires , c'est a dire si on nous demande cheval et lapin , est ce que la combinaison suivante ai possible :

Anticoprs de cheval antiimunoglobuline dirigé contre des anticorps de souris couple a la rhodamine
avec des anticoprs de requin antiimunoglobuline dirigé contre des anticorps de lapin couple au GFP

( si on remarque bien , un de mes anticorps de mon sujet est couple au fluorochrome donc il est l'anticorps secondaire tandis que l'autre animal de mon sujet est l'anticorps primaire !

Est ce possible sa ou bien faut t'il que les 2 animeaux indiqué dans le sujet soit les 2 animeaux ayant les anticorps primaires ou alors les 2 anticorps secondaire mais pas un melange des 2

J'espere avoir etait plus clair , merci encore
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Re: Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar levure » 16 Déc 2014, 23:30

Du coup je comprends pas de quels animaux indiqués dans le sujet tu me parles :oops:
Généralement dans le sujet on te dit les anticorps primaires qu'on a utilisé pour visualiser les protéines.

Par exemple voilà l'énoncé du QCM 1 du concours de l'an dernier :
:gigi: a écrit: Des expériences de double immunofluoresence ont été conduites avec des anticorps primaires de souris dirigés contre p53 et des anticorps primaires de lapin dirigés contre la protéine Myc

Ensuite on veut révéler ces anticorps primires donc on te laisse le choix entre différentes combinaisons possibles d'anticorps secondaires.


Ici on n'aura pas le droit de choisir comme anticorps secondaires :
- des anticorps de lapin anti-immunoglobuline de souris
- des anticorps de lapin anti-immunoglobuline de lapin
- des anticorps de souris anti-immunoglobuline de souris
- des anticorps de souris anti-immunoglobuline de lapin
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Re: Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar Mendel » 16 Déc 2014, 23:42

Voila daccord , par contre est ce qu'on pourrait utiliser des anticorps de cheval anti-immunoglibuline de souris

Ou bien seulement des anticorps de souris anti-immunoglobuline de cheval !

Je sais pas si j'arrive a etre clair , merci
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Re: Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar levure » 16 Déc 2014, 23:48

Si l'anticorps primaire est un anticorps qui provient d'une souris tu pourras utiliser des anticorps de cheval/chêvre/chien/chat/toutcequetuveux anti immunoglobuline de souris mais tu pourras pas utiliser d'anticorps anti immunoglobuline de cheval si il n'y a pas d'anticorps primaire de cheval à reconnaître
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Re: Visualiser 2 proteine distincte

Messagepar Mendel » 17 Déc 2014, 07:48

Dac merci
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