Ingrédients pour une bonne PCR :)

[om nom]

Bonjour !
Es ce que pour la PCR toutes les choses nécessaires sont :
- 2 copies de l'ADN (d'ailleurs pourquoi 2 ?)
- ADN polymerase
-dNTPs
- ddNTPs
-ADN matrice


Voilà merci si vous pouvez me confirmer ça!

[Azula]

Bonjour !
Salut

Es ce que pour la PCR toutes les choses nécessaires sont :
- 2 copies de l'ADN (d'ailleurs pourquoi 2 ?) : sert de matrice pourquoi 2 copies ? sûrement voulait-il dire 2 brins ?
- ADN polymerase pas n'importe laquelle attention la Taq qui est une enzyme thermostable pouvant fonctionner aux températures extrêmes qu'imposent la PCR. Une polymérase humaine se dénaturerait avant même d'arriver à ces températures.
-dNTPs oui ils permettent l'élongation de la réplication en étant incorporés
- ddNTPs : oui mais attention ils doivent être fluorescent. Lorsqu'ils sont insérés il bloque l'élongation de la réplication, diapo 66 poly 3 :
Utilise des terminateurs de chaîne (didéoxynucléotide, ddNTP) fluorescents
La réaction de PCR s’arrête à chaque incorporation possible d’un ddNTP
Mélange de fragments dont la taille indique chaque position d’un dNTP
Le fonctionnement de la PCR est vu plus en détail en UE11 au second semestre, je te détaille pas car ce sera inutile pour vendredi mais ce sera revu au S2
-ADN matrice : oui mais en fait c'est tes 2 copies d'ADN qui servent de matrice, rappelle toi brin parent sert de matrice à la synthèse d'un brin fils.
Tu as oublié une chose primordiale = les amorces qui sont nécessaires à l'initiation de la réplication, sans elle l'ADN polymérase ne peut pas assurer la polymérisation on les appelle en PCR "primers".


Voilà merci si vous pouvez me confirmer ça!

De rien BONNE FIN DE REVISION

[om nom]

Merci merci beaucoup génialissime !