Il y a quelque chose que je ne comprends pas à propos du clonage d’expression.
Je vais prendre un exemple pour essayer de m’expliquer.
Si un individu à 10 mutations dans son génome, ce qui va conduire à la création de 10 protéines mutées mais il y en aura qu’une seule qui va être responsable de sa maladie. Donc on part des ARNm qui donneront les futures protéines. On les transforme en ADNc. On les met dans notre plasmide. Associés aux tag on va pouvoir bien voir si la protéine a été intégré dans la cellule ou non, puis si on voit que la cellule qu’on obtient est totalement normale ça veut dire que la protéine n’est pas responsable de sa maladie.
Donc là tout est logique.
Sauf qu’ensuite je ne comprends pas l’utilité de faire des northern-blot et western-blot puiqu’on sait déjà quel ARNm on a mis dans la cellule. Je comprends comment les faire mais je ne vois pas leur utilité. A la limite pour extraire les ARNm pour pouvoir ensuite les intégrer dans le plasmide oui je vois pourquoi mais il faudrait que ce soit placé avant dans le cours, ce qui n’est pas le cas.. et pour les protéines alors là je vois pas du tout…
Merci d'avance !
