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Protéine de fusion


Protéine de fusion

Messagepar sebastienhf » 27 Sep 2015, 08:02

Bonjour !

Il y a un point que j'ai du mal a comprendre.. Quand on parle de fusion traductionnelle, on associe au gêne GFP directement la protéine X ou bien le gêne correspondant ?
J'ai l'impression que c'est la protéine X, du coup je voulais comprendre comment se passe la transcription et la traduction étant donné qu'on a déjà une portion de protéine ? Le mécanisme s'arrête naturellement une fois que le gêne GFP a été transcrit ?

Merci d'avance :)
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Re: Protéine de fusion

Messagepar Zork » 27 Sep 2015, 09:58

Salut !

On associe au gène de la protéine le gène de la GFP pour qu'à l'étape de transcription on forme l'ARNm Prot-GFP et qu'on traduise une protéine avec un chromophore qui sera directement fluorescent, une fois ce gène formé on fera une transfection vers le noyau de notre cellule (avec les différents mécanismes étudiés pour faire rentrer un gène dans une cellule) pour lui faire exprimer (juste un doute sur l'expression transitoire ou stable par recombinaison j'aurais tendance à dire une expression transitoire de la protéine GFP :))

Par rapport à comment est formé quoi on en parle pas au S1 mais faut savoir que du coup ton gène de la protéine X possède son promoteur et sa séquence poly-A de transcription, ce qu'on va faire c'est qu'on va enlever soit le promoteur de la protéine soit sa séquence de fin de transcription pour les remplacer dans l'ordre par : Promteur GFP-GèneGFP-Protéine X-Séquence Poly-A protéine X ou alors Promoteur Protéine X-Gène Protéine X-Gène GFP - Séquence fin de transcription poly-A GFP :) La transfection est à différencier de la transduction qui concerne l'insertion de gène étrangers à un procaryote comme une bactérie à l'aide d'un plasmide :)

J'espère t'avoir aidé :)
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Re: Protéine de fusion

Messagepar MrCitron » 27 Sep 2015, 18:29

Bonsoir <3

Je confirme la réponse de Zork
(Ce seras une expression transitoire, on essaye même pas de faire intégrer le gène dans notre ADN car on n'en a aucune utilité)

Bonne soirée <3
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Re: Protéine de fusion

Messagepar sebastienhf » 27 Sep 2015, 20:29

Ca marche merci à vous deux !! :)
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