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Vecteur et insert


Vecteur et insert

Messagepar Bardamu » 16 Jan 2016, 11:13

Salut !

Je comprends pas trop cette phrase de la fiche page 3 :
Vecteur et insert digérés par les enzymes de restriction → Hybridation → Ligation des deux par la T4 DNA ligase


Pourquoi le vecteur et l'insert sont digérés ?

Comment ils font pour s'hybrider si c'est pas exactement la même séquence mais dans l'autre sens ?

Merci ! :)
Dernière édition par Bardamu le 16 Jan 2016, 18:05, édité 1 fois.
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Re: Vecteur et insert

Messagepar Sow~ » 16 Jan 2016, 17:57

Coucou! :)


La digestion permet de linéariser le vecteur afin qu'il puisse intégrer l'insert :

Capture d’écran 2016-01-16 à 17.29.40.png

Et en fait, de préférence, on va utiliser le même type d’enzymes de restrictions sur le vecteur et sur l’insert pour avoir les mêmes extrémités franches ou cohésives :

Capture d’écran 2016-01-16 à 17.41.21.png

Sauf qu'il peut arriver qu'on ne puisse pas utiliser les mêmes enzymes de restrictions pour l'insert et pour le vecteur. Dans ce cas, on peut faire appel à d'autres enzymes (nucléase S1, Klenow...) pour corriger ça :

Capture d’écran 2016-01-16 à 17.49.43.png

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Re: Vecteur et insert

Messagepar Bardamu » 16 Jan 2016, 18:05

Parfait ! Merci !
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