TUT 9 QCM 8

[Elchurros]

Coucou

Par rapport à l'item C, est ce que l'hybridation biotine/streptavidine est considérée comme une étape de purification ?
J'avais compris que c'était grâce aux billes magnétiques qu'on faisait la purification ...

Merci d'avance, et merci pour ce tut

[Saravioli]

Hello


J'avais compris pareil aussi Merci pour le tut

[Sow~]

Coucou!


Alors, pour l'étape de purification, on utilise bien des billes magnétiques recouvertes de streptavidine et un aimant.
Et il faut savoir qu'il existe une forte affinité entre la biotine (présente sur nos fragments d'intérêt capturés) et la streptavidine. Cette forte affinité va permettre une hybridation biotine/streptavidine.

Nos fragments d'intérêt sont donc biotinylés et fixés aux billes. Et grâce à l'aimant, on va pouvoir récupérer ces fragments.
Tout ça fait partie de l'étape de purification.

C'est mieux?

[Elchurros]

Merci pour l'explication

Ducoup on a 2 étapes de purification pour faire le NGS
1) avec les billes recouvertes de streptavidine et les fragments biotinylés
2) avec la puce recouverte de puits et les billes
C'est bien ça ?

[Sow~]

Re!


Dans la purification, on a les billes recouvertes de streptavidine qui interagissent avec les fragments biotinylés.
L'étape avec la puce (séparation des sphères dans les puits), c'est lors du séquençage individuel des sphères.

C'est pas les mêmes étapes : on a d'abord purification, puis séquençage dans les puces.

C'est bon?

[Elchurros]

Ah d'accord ! merci bcp