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Endonuclease/enzyme de restriction


Endonuclease/enzyme de restriction

Messagepar La Nissart » 29 Avr 2016, 17:56

Salut,
Pour la préparation de l'ADN pour la PCR en émulsion,
Lors de la segmentation de l'ADN en 200 à 400 pb on utilise des endonucleases mais est qu'on peut dire qu'on utilise des enzymes de restrictions ?

Est ce que mon mode de raisonnement est correct:
Les enzymes de restrictions sont des endonucleases spécifiques qui coupent des séquences spécifiques alors que les endonucleases en général ne sont pas spécifiques

Merci :)
Il ne savait pas que c'était impossible et il l'a fait !
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Re: Endonuclease/enzyme de restriction

Messagepar La Nissart » 02 Mai 2016, 12:49

up :)
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Re: Endonuclease/enzyme de restriction

Messagepar Sow~ » 02 Mai 2016, 22:33

Salut! :)


Ton raisonnement est correct. ^^

Sinon, pour ta question sur la fragmentation de l'ADN, voilà la réponse de la Prof :
Dans la méthode par capture, lors de la fragmentation de l’ADN, on utilise des endonucléases. Les enzymes de restriction, qui sont des endonucléases, peuvent-elles aussi être utilisées pour cette étape ?
:arrow: Non. L’inconvénient des enzymes de restriction, pour la méthode de capture, c’est que la coupure va se faire en fonction d’une séquence spécifique. Or, pour la fragmentation de l’ADN génomique on veut générer des fragments aléatoires de 200 pb. Avec une enzyme de restriction les fragments ne seront pas forcément de 200 pb. En revanche les endonucléases utilisées vont couper aléatoirement tout l’ADN et en fonction du temps d’incubation elles vont générer des fragments de 200 pb. Si on prolonge le temps d’incubation les fragments seront plus petits (< 200 pb) et inversement.


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Re: Endonuclease/enzyme de restriction

Messagepar La Nissart » 03 Mai 2016, 06:56

Perfectt merci beaucoup :wink2:
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