Sphère biotine

[Brynn]

Salut!

Pourquoi ici le bout d'ADN attaché a la sphère est-il biotinylé?

(c'est le brin qui permet la synthèse du brin attaché a la sphère qui est biotinylé mais pourquoi la sphère?)

[Majd]

+1111 en plus le bout du brin rattaché à la sphère c'est le côté 3' du coup jz vois pas pourquoi est ce qu'on dit que la sphère est biotinylé en 5' !!

[Diane Cousin]

+1 j'ai un problème aussi parce que pour moi le brin biotinylé en 5' ne sert pas pour le séquençage individuel des sphères (il est dénaturé après la purification par les billes de streptavidine non dit cette année mais dans la fiche de l'an dernier) hors sur le schéma (qui est bien issu de la diapo) on a l'impression que le séquençage des sphères se fait à partir du brin biotinylé

[Dev7]

+1 !! Ma théorie c'est qu'ils ont juste utilisé le meme schéma que précédemment mais que les ADN biotinylés après purification ( l'étape précédente) ont du être séparé par dénaturation. En attente d'une confirmation

[voilivoilo]

++++1 je ne comprends il ne devrait plus y avoir de biotine!! Dans la fiche de l'an dernier du tut il y a exactement la même image meme paragraphe mais SANS biotine justement parce qu'on l'a enlevé pour le séquencage

Apres en réfléchissant on nous dit que la puce est un support métallique DONC est ce qu'on rajouterait une biotine et est ce qu'il y aurait dans chaque puit une bille magnétique + streptavidine pour bien fixer le fragment d'ADN dans chaque puit ????

[Luffylink]

Mouaip ...

Je sèche moi aussi :')

Je lui poserai la question

(Désolé pour le retard, entre le stage et les révisions c pa facil )

[tartine costaude]

+1 il y a un problème là ...

[Luffylink]

Je viens de faire un tour sur le forum de l'année dernière (A la toute fin, n'oubliez pas ce réflexe )

C'est par ici

Le récap me semble bien complet, et répond à cette question

Je vais tout de même demander validation par la prof

[tartine costaude]

Salut,

Merci beaucoup pour le lien

Par contre dans le cours de cette année, le schéma du séquençage (diapo 18) montre bien que le brin attaché à la sphère (le brin à séquencer) est biotinylé en 3', contrairement au récap de la tutrice où il est non biotinylé.

S agit il d une erreur du professeur ?