Compartimentalisation cellulaire

[sansa]

Salut

Je n'ai pas trop compris comment ça a été prouvé (mes recherches internet ont non plus rien donné):

Est ce que les enzymes ont aussi été centrifugée et se sont déposées au niveau de coussin de densité de leur organite caractéristique ? (ce qui serait étrange)

Ou on a isolé chaque coussin et je ne sais pas par exemple déposé des AC fluorescents anti-catalase ou anti-phosphatase pour voir où s'expriment (ou pas) les enzymes ?

C'est pas précisé et j'ai du mal à trouver ça logique, je vous remercie d'avance !

[yaya06]

Bonjour,

alors le procédé de la centrifugation à gradient de densité (car c'est une séparation selon la densité et non pas la masse)est le suivant :
1-La préparation à analyser (fraction microbodies comprenant les mitochondries, peroxysomes et lysosomes) est déposée sur le sommet du gradient (gradient fait de coussin de sucrose de densité différente), puis on centrifuge à équilibre.
2-Chaque type de particule sédimentera jusqu'à ce qu'elle atteigne la concentration(solvant de sucrose) correspondant à sa densité.
3- Elle s'immobilisera alors à ce niveau.
4- On récupère les différentes fractions qui ont sédimentées à différents niveaux
5- On effectue des tests enzymatiques pour vérifier de quel enzyme il s'agit.
6- On prouve alors que certaines enzymes sont bien représenter que dans certains compartiments.

J'espère que c'est plus clair pour toi, n'hésite pas si tu as des doutes sur ma réponse ou quoi, bonne journée

[sansa]

Oui je te remercie bonne journée à toi aussi !