flip

[Cataleya06]

Saluuut concernant le FLIP

il est dit que "outre la vitesse de diffusion , nous saurons aussi quel compartiment est en relation avec quel autre de la cellule" , pourriez
vous m'expliquer je n'ai pas très bien compris

Pareil je n'ai pas compris en quoi le FLIP permet de mettre en évidence la fluidité de la membrane

[luciférase]

Salut
En fait pour le FLIP, tu irradies une zone et tu regardes la disparition de la fluorescence dans une autre zone. Donc si admettons tu irradies au niveau du REG, et que tu regardes la disparition de la fluorescence au niveau de la membrane plasmique, tu pourras étudier les échanges de protéines marquées entre le REG et la membrane plasmique. Ca te permet de savoir si un compartiment est en relation avec un autre.

Et en ce qui concerne la fluidité de la membrane, tu peux m'indiquer le passage de la ronéo où tu as vu ça stp ?

[Cataleya06]

Mercii j'ai compris la première partie de ma question concernant la deuxième c'est roneo 2 p 14 j'ai pas compris en Quoi Le frap flip nous informe sur la fluidité de la membrane , à un moment c'est dit " ca Nous dit qu'une partie des protéines est mobile. On va obtenir un plateau , Ca veut dire que la moitié des protéines est mobile et l'autre moitié Non mobile "

[luciférase]

En fait dans la membrane plasmique il y a des protéines mobiles et des protéines immobiles, la proportion de protéines mobiles par rapport aux protéines immobiles témoigne de la fluidité de la membrane : plus y il a de protéines mobiles dans la membrane, plus cette dernière est considérée comme fluide.
Grace aux techniques de photoblanchiment, tu peux arriver à estimer la proportion de protéines mobiles dans la membrane : si la fluorescence revient complètement après irradiation (là on parle du FRAP), c'est que toutes les protéines sont mobiles (puisqu'elles se sont déplacées jusqu'à l'endroit précédemment irradié) --> la membrane est très fluide.
Si au contraire la fluorescence ne revient pas du tout, c'est que toutes les protéines sont immobiles (puisqu'elles ne se sont pas déplacées jusqu'à l'endroit irradié) --> la membrane est très rigide.
En pratique, les protéines de la membrane ne sont pas toutes mobiles ou toutes immobiles : certaines sont mobiles, d'autres pas. Si on observe un retour de fluorescence équivalent à la moitié de la fluorescence avant irradiation, on en conclut que la moitié des protéines sont mobiles et l'autre moitié sont immobiles (puisqu'une partie de la fluorescence est revenue mais pas complètement !)
Du coup on parvient à estimer la fluidité de la membrane en regardant l'intensité du retour de fluorescence après irradiation : plus elle revient, plus les protéines sont mobiles et la membrane est fluide. Moins elle revient, plus les protéines sont immobiles et la membrane est rigide.

[Cataleya06]

merci