Salut
Alors pour la microscopie optique, n'oublie pas qu'à l'intérieur on y trouve la microscopie à contraste de phase, qui est la technique de choix pour faire de la microscopie time lapse (donc en temps réel avec les cellules qui bougent et donc vivantes !). Pour voir des cellules vivantes on a aussi la microscopie confocale et la microscopie à super résolution. Et en dehors de la microscopie optique, on a la microscopie à force atomique

Et pour ta deuxième question, tout ce qui compte pour le FRET c'est que le spectre d'émission du donneur recouvre le spectre d'excitation de l'accepteur, et que les 2 émettent des couleurs différentes, par exemple :

Un donneur qui absorbe dans le
Vert et émet dans le
Vert
Un accepteur qui absorbe dans le
Vert et émet dans le
Rouge Dans ce cas là, si tu envoies du vert et que les molécules
ne colocalisent pas : le donneur enverra du vert de son côté, l'accepteur enverra du rouge de son côté
Si tu envoies du vert et que les molécules
colocalisent cette fois : le donneur enverra tout son vert à l'accepteur (donc on ne verra pas de vert), qui lui même s'en servira pour émettre du rouge. Du coup on ne verra que le rouge, le principe du FRET est bien respecté

C'est good ?