Saluut !
Je vais t'expliquer, tu vas voir que la réponse du prof est très cohérente avec ce qui est dit dans la ronéo. Donc avant de faire un FRET il nous faut donc
2 protéines dont l'on souhaite explorer la proximité.
Pour qu'il y ait FRET, il faut avoir au préalable fixé
un fluorochrome à ces protéines, sinon il n'y a pas de FRET.
On aura donc créé au préalable un gène
GFP-X et un gène
BFP-Y (j'ai pris l'exemple ou on avait 2 protéines X et Y et 2 fluorochromes: BFP et GFP)
Ce gène exprimera la
protéine hybride GFP-X et la
protéine hybride BFP-Y.Ainsi si tu observes un FRET ca veut dire que c'est ta protéine
HYBRIDE GFP-X et ta protéine HYBRIDE
BFP-Y qui auront interagit ensemble, car on ne peut pas savoir si tes protéines X et Y seules ont interagit ensemble vu qu'elles ne sont pas FLUORESCENTES.
Si tu observes un phénomène de FRET, donc un changement dans le fluorescence, tu peux être
SÛR que ta GFP-X a interagit avec BFP-Y, vu qu'il y a une fluorescence différente
(et qui dit fluorescence dit fluorochrome ...) MAIS il n'y a aucun moyen d'être sûr ( du moins juste avec cette expérience) que ta protéine X sans fluorochrome interagit bien avec ta protéine Y sans fluorochrome vu que là on a uniquement observé l
'interaction entre 2 protéines hybrides, qui portent toutes les 2 un fluorochrome (susceptible de changer leur comportement effectivement)
Donc tu peux
DÉMONTRER que GFP-X et BFP-Y interagissent ensemble vu que tu as bien un changement dans la fluorescence, on en est sûr, c'est la fluorescence qui nous le confirme, on le voit.
Par contre tu ne peux que
SUGGÉRER que X et Y (sans fluorochrome) interagissent ensemble, vu que leur fluorochrome peut éventuellement changer leur comportement.
C'est bon pour toi ?
