sélection blanc/bleu

[BloodyMary]

Coucou

à propos de la sélection blanc/bleu, elle permet uniquement de s'assurer de ne pas sélectionner les bactéries qui ont intégré des plasmides sans insert ?

Malgré la sélection grâce à l'antibiotique, est-ce qu'il est possible qu'il persiste des bactéries sans plasmide ? Si oui, cette sélection ne permet pas de les distinguer ? Vu qu'elles seront blanches comme les bactéries ayant intégré l'ADN recombinant, étant donné qu'elles n'ont pas du tout le gène de la ß-galactosidase ?

Merci d'avance

[Lilou Sanger]

Coucou !
Le vecteur contient un gène de résistance aux antibiotiques, don c avec ou sans insert il résistera aux antibios
Par contre après l'étapes de sélection par les antibiotiques on aura des bacteries avec et sans insert
C'est pour ça qu'on va utiliser la sélection blanc/bleu, pour les différencier.
S'il y a l'insert, la gène de la béta galactosidase ne sera plus fonctionnel car coupé en deux, donc la colonie sera BLANCHE
Or si l'insert n'a pas été intégré, la gène de la béta galactosidase reste fonctionnel et produit une substance bleue

Donc petit récap :
- La sélection par antibiotiques permet de différencier les bactéries ayant intégré un vecteur ou no,, mais sans distinction entre celles qui ont l'insert ou non
- La sélection blanc/bleu permet de sélectionner les bactéries ayant un insert qui formeront une colonie blanche

C'est bon pour toi?

[BloodyMary]

D'accord merci