DM pré EB carte de restriction

[Mel'Antibio]

Coucou !

Je n'arrive pas à comprendre comment on trouve les 2 fragments de 200pb lorsque l'insert porte la mutation même avec les schémas je m'embrouille...

Merci d'avance

[Stabilo'drey]

Coucou !

Déjà il faut repartir de l'étape où on a l'insert sans la mutation.
Jusqu'ici je pense que tu as compris, c'est "classique"
Et on obtient que notre morceau avec l'insert fait 400 pdb.

Maintenant quand on a l'insert avec la mutation, la mutation va créer une séquence qui est reconnu par une enzyme de restriction et qui va donc être coupé. On va avoir 1 brin en plus que dans les cas précédents parce qu'il y a un nouvel endroit où l'on va coupé notre insert.

Donc à ce stade, on sait que notre insert de 400 pb va être coupé en 2, mais on sait pas encore commet (est ce que c'est 2 morceaux de 200 pb, 1 de 100 et un autre de 300 etc...)

On sait exactement où se place l'insert : il est à la 300e pdb
Nos enzymes sont à la 200e pdb et à la 400e pdb.

On va donc avoir : 100 pdb (de 200 à 300) L'INSERT 100 pdb (de 300 à 400)
Et comme l'insert fait 200 pdb on fait 100 + 100 + 200 = 400 on retombe sur nos pattes avec notre morceau de 400 pdb

Ok mais maintenant on sait aussi la position exacte de où l'enzyme va couper dans l'insert.
On dit qu'il coupe l'insert à la moitié. C'est à dire que quand l'enzyme coupe on va avoir notre insert qui ne fait plus 200 pdb mais 2 morceau de 100 pdb.

Et avec ça, on va regarder de nouveau au niveau du vecteur et de notre séquence à 400 pdb :

100 pdb (de 200 à 300) 1ère partie de L'INSERT (100 pdb) ON COUPE 2e partie de L'INSERT (100 pdb) 100 pdb (de 300 à 400)

(En bleu c'est le vecteur et en violet l'insert)

Donc les 2 morceau qu'on obtient sont de part et d'autre de la coupure soit 2 fois 100 + 100 = 200
On obtient donc nos 2 morceaux de 200 pdb

Je suis désolé pour le temps de réponse, mais je cherchais comment reformulé mon explication.
En tout cas j'espère que ça t'as aider, dis moi si tu as compris mon !

[Mel'Antibio]

Merci pour l'explication détaillée j'ai tout compris avec les différentes étapes !
Bonne journée