Apparté sur la dephosphorylation

[Guillaume83]

Bonjour
Je comprends pas le problème si la T4 dna ligase en cas de borts francs referme le vecteur avec son insert en créant des liaisons phosphoester quand il n'y a pas eu de déphosphorylation
Pour moi c'est justement le but de lier vecteur et insert ...
Je comprends pas en quoi la phosphatase est nécessaire dans ce cas là
Merci pour ta réponse

[Stabilo'drey]

Coucou !

Alors effectivement nous ce qu'on veut c'est de mettre d'insert dans le vecteur.
Mais le but de la déphosphorylation c'est d'éviter que le vecteur se referme sur lui-même sans intégrer l'insert.

Je te laisse aller voir ce post où j'explique en détail à quoi sert la déphosphorylation
https://www.carabinsnicois.fr/phpbb/vie ... 7&t=162161

Tu comprends mieux ??

[Guillaume83]

Ok merci je comprends mieux