PCR + Séquençage

[TransaMinhNhase]

Hello !

Je me demandais s'il était possible de faire un séquençage sans passer par la case PCR ?
J'ai vu dans les annales qu'on parlait de séquençage "direct" est-ce qu'on peut plus développer stp ? Comment c'est fait ? Dans quel cas on l'utilise ?

[Stabilo'drey]

Coucou !

Si tu parles du séquençage Sanger, NON on ne peut pas faire de séquençage sans passer par une étape de PCR. Il nous faut un nombre de brins suffisant pour réaliser le séquençage. On te dit même qu'on ne peut pas faire de séquençage sur un brin d'ARN parce que la PCR n'est pas possible puisque la TAQ polymérase ne peut pas lire un ARN. Et la prof parle systématiquement de séquençage + PCR.

Dans le cours on ne parle pas de séquençage direct. Donc c'est surement quelque chose qui est devenu hors programme.

Pour ce qui concerne le séquençage fait en NGS, normalement c'est la même chose, on a une étape de PCR clonale, bien que ici on a plusieurs séquençage sur plusieurs brins, mais que 1 séquençage se fait pendant l'élongation d'un seul brin. Peut-être qu'aujourd'hui il existe des méthodes pour séquencer l'ADN sans passer par une PCR mais ce n'est pas développé dans les cours.

Est ce que tu peut me dire le QCM (au moins l'année) où on parle de séquençage direct, et si je vois quelque chose qui me choque j'irai poser la question à la prof !

J'espère que c'est bon pour toi ?

[TransaMinhNhase]

yeees c'est tout bon pour moi !

J'ai parlé trop vite le qcm date de 2014 : "On peut réaliser un séquençage direct sur ARN"
(Le mot "séquençage direct" m'a marquée du coup j'ai pas fait le lien entre direct et ARN )

Merci beaucoup !

[Stabilo'drey]

Ahhhhh oki alors c'est tout bon ! Pas de soucis tkt