Coucouuu !Il faut avoir ce schéma en tête :Définition : La PCR sert à amplifier un fragment d'ADN en un très grand nombre de copies.Tu as deux types de PCR : 
La PCR dite "classique" utilisée dans le cadre d'une
PCR-RFLP ou d'une
PCR-Séquençage :
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PCR-RFLP : Pour la
recherche d'une mutation ciblée connue et précise comme dans le cadre de
l'achondroplasie où tu connais bien les 2 mutations impliquées. Dans ce cas, tu fais une simple PCR (avec mesure de la fluorescence
au bout des 35-40 cycles), puis une digestion enzymatique (d'où le "RFLP") que tu vérifies ensuite par séquençage.
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PCR-Séquençage :
Tu connais le gène impliqué dans ta maladie mais tu veux connaître la mutation précise (au niveau de la séquence nuclétotidique car
plusieurs possibilités de mutations). Tu fais une PCR (toujours avec mesure de la fluorescence
au bout des 35-40 cycles) puis un séquençage sanger. C'est le cas dans le
syndrome de wolfram.
La PCR quantitative = RT-PCR (Real-Time PCR) = PCR en temps réelElle sert en plus d'amplifier à
quantifier la quantité d'ADN. Elle est utilisée dans les
maladies infectieuses pour déterminer les
charges virales et pour
quantifier le nombre de copies de virus. Elle est également utilisée pour
déterminer l’expression d’un ARN. La mesure de la fluorescence se fait
à la fin de l'élongation de chaque cycle PCR.
C'est bon pour toi ?
