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[auriane2008]

Coucou !
Juste je n'ai pas trop compris cet item

" D) Les anticorps secondaires, une fois fixés, rendent les anticorps primaires fluorescents mais ne modifient pas leur
spécificité d’antigène"

D'après ce que j'avais compris c'était les anticorps secondaires qui étaient coplés à un fluorochrome et qui devenaient donc fluo du coup je n'ai pas trop compris comment les Ac primaires pouvaient devenir fluo aussi ?

Ou alors c'est juste qu'ils deviennent "indirectement" fluo comme l'ac secondaire lui meme fluo est fixé dessus ?

Mercii

[Saralgie]

Coucou !! ❤️

Ta deuxième réflexion est correcte, seul l’anticorps secondaire est couplé à un fluorochrome. L’anticorps primaire, lui, n’est jamais modifié : il reste non fluorescent. Mais comme l’anticorps secondaire (fluorescent) vient se fixer sur lui, le complexe primaire + secondaire émet de la fluorescence à l’endroit où se trouve le primaire. Donc, au microscope, on voit de la lumière là où est l’anticorps primaire, et donc là où est la protéine cible.

Dans cet item, “rendent les anticorps primaires fluorescents” doit se lire comme “rendent les anticorps primaires visibles / détectables en fluorescence”, et non “transforment les primaires en molécules fluorescentes”. C’est une fluorescence indirecte, d’où le nom du principe immunofluorescence indirecte.
La deuxième partie de l’item est vraie aussi : « ne modifient pas leur spécificité d’antigène ». L’anticorps secondaire se fixe sur le primaire, pas sur le site de liaison à l’antigène. Le primaire continue donc de reconnaître sa cible (l'antigène) exactement comme avant.

Donc, l’item est à considérer comme vrai, il est juste formulé de façon un peu piégeuse !

[auriane2008]

Ok mercii beaucoup