question Ronéo n°4

[jenny06]

Bonjour,

Alors page 4 de la ronéo n°4, concernant les deux protéines, BFP et GFP, je me demandais si les valeurs sont prises au "hasard" ou il y a une logique ?
En fait, pourquoi quand on l'excite à 360nm ça va émettre à 450nm ? Et pourquoi quand c'est le GFP qui sera excité il émettra à 530nm ? (et pas à 450nm?)

Voilà, j'espère avoir été clair ^^

[BadRomance]

Si je comprend ton problème en faite ce que quand tu fais un FRET tes deux protéines doivent êtres a moins de 10 nm si c'est le cas elles vont se " travailler " ensemble , la BFP excité a 360 nm va transférer sont énergie a la GFP ( si celle ci est a moins de 10 nm ) ce qui va donner l'émission de la GFP c'est a dire a 450 nm or si elles sont loin l'excitation de la BFP ne permettra pas l'échange d'énergie et ne permettra pas a la GFP d'émettre . J'espère que c'est a peu près clair ce que je t'ai raconté ^^

[toche]

Je crois que ta question concerne les propriétés intrisèques des fluorochromes:

Un fluorochrome (par exemple la GFP) est caractérisé par ses longueurs d'onde d'absorption et d'emission. C'est à dire que pour une protéine fluorescente donnée, elle est toujours exitée avec la même couleur et elle emet toujours la même couleur (c'est pas des valeurs prises ''au hasard'')
Ici dans cet exemple,
-la GFP
est excitée à 475 nm (Bleu)
et elle emet à 530nm (vert)

-la BFP
est excitée à 360 nm (violet)
et elle emet à 450 nm (Bleu)



Sachant ces propriétés qui sont donc intrinsèques et invariable pour un fluorochrome donné, tu sais que quand tu excites avec du violet tu sais que c'est la BFP qui sera excitée.

Maintenant, tu observes avec ton microscope:

-Si tu vois une emission de Bleu, tu sais que c'est la BFP qui a émis après avoir été excité, c'est de la fluo normale.

-Si tu vois une emission de Vert, c'est que c'est la GFP qui a émis.
OR ce n'est pas la GFP qui a été excitée, donc elle a du recevoir cette énergie de la BFP. Un FRET a eu lieu . Mais pour qu'il ait eu lieu il faut qu'une condition soit remplie: les deux protéines GFP et BFP sont à moins de 10nm l'une de l'autre.



Dis moi si ce n'est pas exactement ce que tu demandais,



Accrochez vous les loulous, c'est pas facile mais on finit par y arriver.