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Séquençage de l'ADN


Séquençage de l'ADN

Messagepar Half » 14 Mai 2012, 17:40

Bonjour !

Voila, je sais que y'a pas mal de post sur le séquençage, mais ça reprend pas vraiment mon problème.

En fait j'ai plutôt bien compris le protocole mais je n'arrive pas à faire la conclusion de ce protocole.

Une fois qu'on a fait toutes nos étapes et nos cycles, on se retrouve avec des séquences de nucléotides plus ou moins longues suivant que l'ADN polymérase a utilisé des DDNTPs ou des DNTPs.

On fait ensuite notre électrophorèse et ça nous permet de les classer par taille.

Mais une fois qu'on a fait tout cela je n'arrive pas à comprendre (et c'est surement assez bête de ma part ..) ce qu'on en fait. On a classé nos différents fragments, mais concrètement notre but à la base c'était de déterminer la séquence de notre brin de départ, et là on se retrouve avec pleins de fragments, donc qu'est ce qu'on en fait ? Comment à partir de ces fragments retrouve-t-on la séquence recherchée ? (C'est surement simple à comprendre, mais bon comme on dit une question n'est jamais idiote, donc j'ai du raté un passage dans le cours mais j'arrive pas à comprendre cette notion :s)

Merci d'avance !
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Re: Séquençage de l'ADN

Messagepar MaudLG » 14 Mai 2012, 18:55

Saloute! Alors je tente explication!
En fait, chaque fragment de taille différente comme tu le dis, possède un ddNTP de couleur différente. Il exige 4 couleurs de ddNTP: rouge, jaune, vert, et bleu par exemple. Chaque couleur est associée à un nucléotide, genre bleu= A, rouge= C, vert= G, jaune= T
Après, on a va lire notre electrophorèse du fragment le plus petit (donc celui qui est allé le plus loin), vers le plus gros (le moins loin) et on va associer chaque couleur lue au nucléotide qui lui correspond d'après notre code couleur
ET paf! ça fait (des chocapics) une séquence de nucléotides!
Ai-je été suffisamment claire ou pas? ^^
Bonne soirée :)
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MaudLG
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Re: Séquençage de l'ADN

Messagepar Half » 14 Mai 2012, 23:04

Merci beaucoup, j'étais allé trop vite sur l'histoire des couleurs ...

Merci d'avoir pris le temps de me répondre et en plus j'ai compris ^^

Merci :)
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Re: Séquençage de l'ADN

Messagepar gabriel » 15 Mai 2012, 10:51

bon je nai rien a faire ici on dirait!!!mais quelle entraide entre P1!!!;)
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