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Petit problème de visualisation// Cryofracture


Petit problème de visualisation// Cryofracture

Messagepar *Ptitnanane* » 07 Nov 2013, 10:32

Bonjouuur ! :)

Désolée jvais vous embêter un peu parce que j'ai du mal à visualiser le principe de la cryofracture dans ma ptite tête...
Sur la ronéo on explique que le couteau " va systématiquement couper entre les deux feuillets de la membrane biologique"
---> càd entre les 2 couches lipidiques qui forment la membrane ? donc en plein milieu de la membrane??
si c'est le cas je ne vois pas comment cela "permet vraiment de suivre le relief formé par ces membranes" (page7 ronéo3)

et enfin : (tjrs p.7ronéo3) comment est-qu'on peut augmenter les reliefs par sublimation?
J'arrive pas du tout à visualiser le mécanisme et du coup j'ai du mal à comprendre et à retenir....
:( :(
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Re: Petit problème de visualisation// Cryofracture

Messagepar Audre_yy » 07 Nov 2013, 23:05

Salut a toi !!

Alors jvais essayer de te faire un ptit récap sur la cryomicroscopie !

On part avec notre échantillon, le but ça va être à priori d'observer le relief de sa membrane
On va le placer entre deux plaquettes de cuivre
On met l'ensemble dans une solution hyper froide et PAF ça congelé le tout
L'intérêt de la solution HYPER FROIDE c'est que la baisse de température se fait tellement vite que la structure de la cellule est préservée

Une fois que c'est congelé on va tirer sur les plaques de cuivre et ça va casser l'échantillon la ou il est le moins résistant c'est a dir entre les deux feuillets de la membrane biologique

(Et la ... Ptite image !! )
image.jpg


Après ça on va pulvériser des m'étais lourd genre carbone platine sur un des côté de notre échantillon.
On va le pulvériser avec un angle d'environ 45° histoire de faire en sorte que l'épaisseur de métal qui se dépose varie avec le relief de la membrane

image.jpg


C'est ce truc la qui sublime justement et qui permet d'observer le mieux possible notre petite membrane toute mignonne !!!

Bon du coup j'était lancée jtai fait un roman :lol:

J'espère que ça t'aide !!
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Re: Petit problème de visualisation// Cryofracture

Messagepar Liloux » 13 Nov 2013, 14:17

Je m'incrustre un peu :P
Ton explication est top mais tu ne parles a aucun moment du "couteau très très fin" qui,dans la ronéo, sert justement a "couper les deux feuillets de la membrane biologique"...
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Re: Petit problème de visualisation// Cryofracture

Messagepar *Ptitnanane* » 14 Nov 2013, 22:51

(dsl de répondre ke mnt) mais franchement T'assuuureuuuh! Ton explication est Géniale et les petites images aussi ;)
Merci :D
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Re: Petit problème de visualisation// Cryofracture

Messagepar Audre_yy » 15 Nov 2013, 10:57

Coucouuu !!

Alors pour Lilou Mea culpa j'avoue j'ai zappé d'en parler !!
En fait y'a plusieurs façon de le faire :) Soit comme je l'ai expliqué avec les deux plaques que l'on écarte et ça casse l'échantillon le long de la membrane !
Soit avec ce fameux ptit couteau où au lieu d'avoir ton echantillon entre les deux plaques et d'écarter les deux plaque tu utilise ce joli petit couteau très fin pour facturer le long de la membrane ;)

couteau.PNG


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Re: Petit problème de visualisation// Cryofracture

Messagepar Liloux » 15 Nov 2013, 11:00

Pas de soucis je voulais vérifier si j'avais bien compris! :)
Merci beaucoup en tout cas, bonne journée :D
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