QCM 7 tutorat 9

[Emilie_]

Salut

Même si on a une mutation ponctuelle sur un éxon on peut quand même faire la technique du clonage même si elle n'est pas indispensable non ? C'est juste qu'on préfère faire la pcr classique parce qu'elle suffit et plus simple

Voilà merci bien

[Afroblacko]

Plop
Toujours à propos du même QCM mais concernant l'item A du coup.
Parce qu'à pasteur la modification ayant été apportée après l'épreuve j'ai pas trop compris pourquoi cet item est compté vrai
Dans le cas d'une mutation ponctuelle connue ex achondro : on fait PCR-RFLP et c'est tout ^^ pas besoin de séquencer puisque l'on sait déjà où se trouve la mutation.
Après c'est sûr qu'avec la modification on ne pouvait le compter faux mais c'est un peu injuste pour tout ceux qui comme moi ont procédé ainsi.

[Zork]

Salut !

Dans le cas d'une mutation ponctuelle connue ex achondro : on fait PCR-RFLP et c'est tout ^^ pas besoin de séquencer puisque l'on sait déjà où se trouve la mutation.

En cours cette année la prof a précisé qu'il fallait séquencer même s'il s’agissait d'une mutation connue pour s'assurer qu'il y avait bien une mutation au bon endroit connu et qu'il ne s’agissait pas d'une erreur de manipulation
Et pour le clonage je pense que la raison vient de son diapo ou pour une mutation connue qui concerne un site exonique le clonage ne sert à rien puisqu'on a pas deux populations à séparer pour le séquençage

Zorkement !

[Snape]

Moi je comprends pas pourquoi les items BC sont faux car il peut s'agir d'une mutation connue mais intronique (exemple de Wolfram)..
Cimer la bise

[popsi]

+1

[Emilie_]

Ah d'accord bon si la prof le dit dans son diapo alors merci !

[Zork]

@Snape : C'est un errata les tuteurs l'ont donné en plein épreuve il faut rajouter "exonique" dans l'énoncé

[Snape]

Ok alors soit je suis sourd soit j'ai pas eu l'info

[Azula]

Salut

C'est mon qcm je suis désolée que la modif ne soit pas passé à temps à Pasteur

Du coup QCM 7 item C vrai/faux car sans préciser que c'est une mutation exonique, ça peut très bien être le même délire qu'avec le syndrome de wolfman = mutation intronique avec création d'un site cryptique d'épissage > insertion de nucléotides au niveau de l'ARNm du coup séquençage illisible des 2 allèles de la cellule = un ARN sauvage (mais avec la mutation ponctuelle) + un ARN muté ( avec l'insertion). Pourquoi illisible car au début même séquence cool, puis à partir d'un moment il va y avoir 2 séquençages qui vont se superposer et on ne saura pas dire concrètement quel nucléotide appartient à quel allèle, quel nucléotide appartient à l'insertion intronique...
Du coup pour séparer ces 2 populations et pouvoir les séquencer séparément on fait un clonage moléculaire. Voilà en jaune le début du bug :

En revanche Emilie pour répondre à ta question, le clonage n'a aucun sens si c'est une simple mutation ponctuelle exonique car nul besoin de séparer 2 population d'ADN (= but du clonage).
En effet toutes ces techniques qui sont décrites dans le cours suivent une certaine logique. Si comme dans le cas de l'achondroplasie tu n'as q'une mutation ponctuelle, tu es d'accord que faire un clonage ne servirait à rien. On connait la mutation de la maladie qu'on suspecte, on a les enzymes de restriction qui permettent de la mettre en évidence (ça coupe si y a la mutation ou inversement) et on vérifie par séquençage. Mais il n'y a pas de population d'ADN à séparer pour les séquencer à part ...

En résumé dans ce cas là, c'est juste PCR-RLFP et/ou séquençage qu'on peut être amené à faire

Voilà j'espère que c'est plus claire pour vous

Bonne journée