Vecteur d'expression

[om nom]

Bonjour

Ça serait juste pour avoir une petite précision, j'ai compris à quoi servait chaque clonage et tout, pas de soucis mais juste pourquoi le vecteur d'expression a-t-il un gène de sélection procaryote et une origine de réplication procaryote alors qu'il est fait pour aller dans un eucaryote ?

Hypothèse 1
Est-ce que c'est le même plasmide qu'on se sert pour le clonage moléculaire, genre il y a 2 situations :
1. On veut juste avoir une grande quantité d'ADN du père et de la mère séparé vecteur de clonage
2. On veut faire ça aussi + une étude de l'expression et donc du coup dès le départ on utilise un vecteur d'expression et une fois qu'on a séparé les 2 populations, hop on récupère une bactérie on la lyse on récupère son plasmide et hop on le met dans un petit eucaryote joli pour voir son expression ??
Hypothèse 2
Pcq à la base j'avais compris qu'une fois que le clonage moléculaire était fait on récupérait l'insert et on le mettait dans un deuxième vecteur...

Du coup hypothèse 1 ou 2 de juste ? (du coup si la 2 est juste ça ne ressout pas mon problème de savoir à quoi servent ce gène et cette origine procaryote... )

Merci d'avance, j'espère avoir été compréhensible..

[Sow~]

Hello!


On a envoyé un mail à la Prof! ^^ Voilà sa réponse :

Dans un vecteur d'expression utilisé dans une cellule eucaryote, à quoi servent le gène de sélection procaryote et l'origine de réplication procaryote ?
Etant donné leur présence, si on souhaite amplifier notre fragment d'ADN et étudier l'expression du gène, utilise-t-on directement le vecteur d'expression ? Ou utilise-t-on d'abord le vecteur de clonage pour amplifier, puis le vecteur d'expression pour étudier l'expression du gène ?

La préparation des vecteurs d’expression (utilisés dans une cellule eucaryote) se fait dans les bactéries, c’est-à-dire la ligation de l’insert dans le vecteur, la transformation dans les bactéries, l’isolement sur boite de pétri pour sélectionner les bactéries qui ont intégré l’insert, la préparation en grande quantité du vecteur. Il faut donc pour ces étapes le gène de sélection et l’origine de réplication procaryote. Une fois purifié à partir des bactéries, le vecteur d’expression est transfecté dans les cellules eucaryotes. On ne fait donc pas une étape dans un vecteur de clonage avant d’utiliser le vecteur d’expression, on utilise directement le vecteur d’expression.

Ça répond bien à ta question?

[om nom]

Parfait merci